検査方法

検査キットの使い方

やさい・くだもの検査キット

キット内容

【キット内容】
▪取扱説明書
▪検査用プレート（5回分×2）
▪処理用チューブ（5回分×2）
▪処理用スポイトキャップ（5回分×2）

【 準備するもの 】
▪はさみ、カッター等
▪楊枝など

検査葉の採取

ウイルス感染が疑われる症状（退緑・黄化）があらわれた葉を採取して検査に使用します。採取したばかりの葉から症状が出ている部分を選び出し、清潔なはさみやカッターで1cm角に切り出してご使用ください。

試験手順

① 検査液の準備

[ 1 ] 処理用チューブのふたを開ける ※中の液がこぼれないよう注意する。
[ 2 ] 検査葉が中の液体に浸るように清潔な棒（楊枝等）で奥まで押し込む。
[ 3 ] 中の検査葉をすり潰すように指先を使って30回ほど揉む。
[ 4 ] 処理用チューブに処理用スポイトキャップを装着する。

➁ ウイルス検査

[ 1 ] 常温に戻したことを確認してアルミパウチから検査用プレートを取り出す。
[ 2 ] 処理用チューブをキャップ側を下にして持ち、処理液をキャップ側にためる。
[ 3 ] 検査用プレートの楕円形の穴に、処理液をゆっくりと2滴滴下する。
[ 4 ] 長方形の窓に液が流れたことを確認して、20分ほど置いてから結果を判定する。

判定結果の研究

LAMP法との比較

LAMP法

従来のCCYVウイルスの検出にはLAMP法が多く使われてきました。LAMP法は遺伝子増幅法によって、感染葉からウイルスを検出する試験法です。

しかし、LAMP法には下記のようないくつかの課題がありました。
　✓試験操作は専門性が高く、実験室レベルの器具や機器を必要とする。
　✓結果の判定までにおよそ2時間以上かかる。

「やさい・くだもの検査キット」はこれらの課題を解決する、イムノクロマト法を使っています。

LAMP法とイムノクロマト法の判定結果比較

CCYVへの感染が疑われるハウス栽培のキュウリ葉（陽性疑い葉）と室内に隔離して育成したキュウリ葉（陰性葉）を用いて検討を行いました。検体に対し、LAMP法とイムノクロマト法の2種類の検査方法を同時に行い、その結果を比較しました。
下記の表のとおり、両検査における判定結果に相違はないことを確認しています。

検体名	検体葉	判定結果 （LAMP法）	判定結果 （イムノクロマト法）
陰性葉サンプル		陰性（ー）	陰性（ー）
陽性疑い葉サンプル		陽性（＋）	陽性（＋）